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印度出现新情况:20%新冠患者检测阴性,究竟发生了什么?

2021-05-02 来源: 华尔街见闻 原文链接 评论0条

印度疫情急剧恶化,随着时间的推移,每日新增新冠病例数不断创下新高。然而更可怕的是,数字背后的真实感染人数远超想象。

印度媒体报道,随着新冠测试需求的不断增加,一个新的情况出现了——高达20%的有症状患者的RT-PCR检测结果是阴性。

这种假阴性现象的出现,不仅意味着大批已经感染新冠病毒的患者,因为检测试剂的结果而被医院拒之门外;更重要的是随着这些患者四处走动,病毒也正在传播向更多的地方。

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什么是RT-PCR检测法?

RT-PCR检测被认为是诊断新冠病毒的黄金标准。根据此前的券商研报介绍:

PCR核酸检测法的基本原理是根据已知基因序列信息,设计多对特异引物,运用DNA聚合酶链式反应(PCR)扩增技术,对处理后的样本进行基因扩增,因为引物的特异性,如果样本存在目标病原体,则会扩增出相应的目标基因片段,由此判断是否阳性。

只要知道目标基因序列,设计多对引物,就可以套用已有技术平台,进行检测试剂盒开发,所以核酸法研发最快。

新冠病毒是RNA病毒,所以在PCR之前还需加上反转录(RT)过程,将RNA反转录成DNA后,再进行PCR。

印度医学研究理事会(ICMR)对RT-PCR检测要求的最低灵敏度(即检测阳性的能力)为95%,也就是说会有5%的假阴性结果。

然而现实情况是,印度媒体了解到,印度的假阴性结果的比例正在上升,尽管尚未有数据支持。

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造成假阴性的原因是什么?

理论上,RT-PCR检测结果的准确性又四个因素决定:病人体内的病毒载量、检测样本收集和处理的质量、试剂本身的有效性、以及检测解释的标准。

根据这些因素,有印度媒体总结了印度假阴性结果比例如此之高的可能原因。

首先以病毒载量为例,可能跟提取部位有关。

一些在RT-PCR检测中呈假阴性结果的患者随后在支气管肺泡灌洗液(BAL)检测中呈阳性,即样本是从下呼吸道收集。这让一些人猜测,某些病毒变种绕过了上呼吸道、以肺部为目标,这可能导致基于鼻腔和喉咙样本的RT-PCR检测失效。 

其次,是处理能力不足。数据显示,印度新冠病毒检测实验室数量从2020年2月初的14家,大规模增加到2021年4月的逾2400家。这不仅需要相关部门快速批准实验室,同时也需要大批训练有素的技术人员。

印度媒体称,ICMR在2020年7月列出了30家质控机构对所有获批的检测实验室进行检查,随后又再增加了8家质控机构。然而消息显示,这些质控机构只对设备进行了几次检查,并没有随机抽取样本进行复检。

第三是人为因素。所有的RT-PCR检测试剂包括了一个内部控制(Internal Control, IC),以防止没有RNA提取或扩增的情况。这个IC分外源性和内源性,印度市场超过75%的RT-PCR检测试剂是更便宜的外源性IC。起初ICMR认为外源性IC无法反应采集样本的质量,但是最后由于厂商抗议这种要求阻碍了公平竞争,而最终修改为外源性和内源性都可以。

最后一点当然就是大家最关注的病毒突变了。RT-PCR检测的是特定一个或一些病毒基因片段,但是如果突变部位恰好是检测部位,那么就会出现假阴性结果。

见闻此前文章提到,继此前发现双重变异病毒之后,印度多地已经出现三重变异病毒(triple-mutant variant,也称双突变变异病毒),即三种不同的新冠病毒毒株结合形成一个新的变种。这种新变种毒株比其他旧毒株具有更强传播力,为抗击疫情雪上加霜。

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